精确称取预经在硅胶上干燥4h后的试样300mg，溶于20ml冰醋酸中，必要时略微加热以助溶。加100ml苯和2滴结晶紫试液(TS-74)后，用0.1mol/L高氯酸滴定。同时进行空白试验并作必要修正。每Ml0.1mol/L高氯酸相当于烟酰胺(C6H6N2O)12.21mg。
或用高压液相色谱法(GT-10-4)测定。
仪器设备
仪器设备： 可见分光光度计 试样制备： 1. 供试品溶液的制备
取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于烟酰胺60mg），置100ml容量瓶中，加盐酸（9→1000）溶液75ml，置水浴上加热15分钟并实施振摇使溶解，放冷至室温，用盐酸（9→1000）溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml置200ml量瓶中，用盐酸（9→1000）溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
应用范围
本方法采用分光光度法测定烟酰胺片中烟酰胺的含量。
本方法适用于烟酰胺片。
方法原理
取本品适量，加盐酸（9→1000）溶液加热使烟酰胺溶解，并加盐酸（9→1000）溶液定量稀释，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在261nm波长处，测定吸光度，按c6h6n2o的吸收系数（e1%1cm）为430计算，即得。
试剂
盐酸（9→1000）溶液
试样制备
1. 供试品溶液的制备
取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于烟酰胺60mg），置100ml容量瓶中，加盐酸（9→1000）溶液75ml，置水浴上加热15分钟并实施振摇使溶解，放冷至室温，用盐酸（9→1000）溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml置200ml量瓶中，用盐酸（9→1000）溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤
精密量取上述供试品溶液，照紫外-可见分光光度法，在261NM波长处，测定吸光度，按c6h6n2o的吸收系数（e1%1cm）为430计算，即得。