聚葡萄糖检测方法
鉴别试验:
溶解性极易溶于水。按OT-42方法测定。蔗糖试验取10%试样液1滴,加入5%苯酚液4滴,然后迅速加入浓硫酸15滴,应产生深黄至橘黄颜色。丙酮试验取10%试样液lml,在强烈搅拌下加入丙酮1ml,溶液应透明。再在强烈搅拌下加入丙酮2ml,应即呈稠厚状乳白色浑浊。还原糖试验取2%试样液lml,加柠檬酸铜碱性试液(TS-76)4ml,加热至剧烈沸腾2~4min,去热源,让其沉淀、澄清,其上层清液应呈蓝色或蓝绿色。
含量检测:
苯酚溶液取苯酚80g,加水20ml。葡萄糖标准液精确称取一D-葡萄糖(纯度>97%)|00mg,放入一500ml容量瓶中,用水定容至刻度,再用水稀释成五份,每份的标准浓度分别为50、40、20、10和5μg/ml。标准曲线用移液管分别吸取每一种葡萄糖标准溶液2.0ml,各放人一容量为15ml的具塞瓶中。加上述苯酚溶液0.12ml,缓缓混合。开盖,仔细加入浓硫酸5ml,加盖后强烈振摇(注意:加硫酸时应戴橡皮手套,并注意安全)。将瓶在室温下维持45min。用适当的分光光度计在490nm波长处测定吸光度,用苯酚溶液/硫酸试剂作为空白对照样测定。本测定须重复进行3次。曲线根据吸光度与浓度(μg/m1)之比绘制。操作准确称取试样约250mg,放于一250ml容量瓶中,用水定容。取该液10ml,再用水定容至250ml。然后按标准曲线中的方法进行吸光度测定。聚合物的百分率按下式计算:
聚合物(%)=1.05×100×A/[(S×c)-Pg-1.11×P1]
式中
A——吸光度;
S——标准曲线的斜率(S=0.02);
c——试样液浓度(除灰分及水分),μg/ml;
Pg和P1——葡萄糖和左旋葡聚糖的百分含量(见下述质量指标分析中单体分析法)。