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胆红素质量检测

非售品
CAS:635-65-4
分子式: C33H36N4O6
分子量:584.7

本品系牛胆汁、胆红素和饱和氢氧化钙溶液经加工制成。


性状

本品为棕红色或棕黄色的粉末。味微腥。


鉴别

取本品粉末5mg,加三氯甲烷15ml,加盐酸溶液(5→10)0.1ml,超声处理30分钟,加三氯甲烷35ml,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。另取胆红素对照品,加三氯甲烷制成每1ml含0.1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ b)试验,吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(1o:1:0.5)为展开剂,展开,取出,晾干。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。


检查

水分 照水分测定法(附录Ⅸ H第一法〕测定,不得过5.0%。


含量测定

对照品溶液的制备 取胆红素对照品10mg,精密称定,置100ml棕色量瓶中,用三氯甲烷溶解并稀释至刻度,摇匀。精密量取5ml,置50ml棕色量瓶中,加乙醇至刻度,摇匀,即得(每1ml中含胆红素10μg)。


标准曲线的制备 精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml,分别置具塞试管中,加乙醇至9ml,再精密加入重氮化溶液(甲液:取对氨基苯磺酸0.1g,加盐酸1.5ml与水适量使成100ml。乙液:取亚硝酸钠0.6g,用水溶解并稀释至100ml,置冰箱内保存。临用时,取甲液10ml与乙液0.3ml,混匀)1ml,摇匀,在15-20℃的暗处放置1小时;以相应的溶剂为空白。照紫外-可见分光光度法(附录Ⅴ a),在533nm波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标,绘制标准曲线。


测定法 取本品适量,研细,取10mg,精密称定,置锥形瓶中,加三氯甲烷-乙醇(7:3)的混合溶液60ml及盐酸1滴,摇匀,置水浴上加热回流30分钟,放冷,转移至100ml棕色量瓶中,容器用少量上述混合溶液洗涤,洗液并入同一量瓶中,加上述混合溶液至刻度,摇匀,精密量取上清液10ml。置50ml棕色量瓶中,加乙醇至刻度,摇匀。精密量取3ml.置具塞试管中,照标准曲线的制备项下的方法,自“加乙醇至9ml”起,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中含胆红素的重量(mg),计算,即得。

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