以9α-羟基雄-4-烯-3,17-二酮（化合物25）为起始原料，氢化、提纯后,得化合物26，惰性气氛下向化合物26的DCM溶液中添加硫酸，搅拌，反应完全后洗涤、真空蒸馏，得灰白色固体化合物27，在-40℃至-45℃惰性气氛下，向化合物27的THF溶液中加入三叔丁基氧氢化铝锂，搅拌反应完全后，添加HCl溶液淬灭反应混合物，分离各相并萃取水层，洗涤、蒸发，得化合物28。向溴化乙基三苯基膦的THF溶液中逐滴添加叔丁醇钾，搅拌1h后向体系中加入化合物28，使反应完全，冰水淬灭，MTBE萃取水层，洗涤并合并有机萃取物，真空浓缩有机层，MTBE纯化粗物质，过滤，蒸馏，制备出化合物29，加入三乙胺、DMAP和乙酸酐，反应得化合物30，经由化合物84或85转化为化合物32，向化合物32的乙酸乙酯溶液中添加TBHP水溶液，0℃下缓慢添加次氯酸钠，搅拌反应，分离并萃取，合并有机层，亚硫酸钠溶液处理2h后用氯铬酸吡啶鎓处理有机层，洗涤并蒸发有机层，纯化得浅黄色固体状化合物24，用Pd/C氢化还原环上的双键，并用三叔丁氧基氢化铝锂还原羰基得到化合物34，碱性条件下水解得脱氧胆酸粗品，纯化即制得脱氧胆酸，NaOH碱化制得脱氧胆酸钠。

其合成路线如下图所示。