反相高效液相色谱法测定L-苯甘氨醇

1、仪器与试剂
　　ShimadzuLC-6A高效液相色谱仪，配有LC-6A高压输液泵；SPD-6AV紫外可见检测器(检测器波长:254nm)；CTO-6A柱温箱；SCL-6B系统控制器(均为日本岛津公司)；HypersilODS2色谱柱:4。6mm×250mm，大连依利特)；超声波发生器；TL9900色谱数据工作站。

L-苯甘氨醇(分析纯)，L-苯甘氨醇合成样品，二次蒸馏水，乙腈(色谱纯)，三乙胺、Vc(均为分析纯)。流动相:水-乙腈-三乙胺；流速:1mL/min；柱温:40℃。

2内标法
2.1溶液的配置
  精确称量125.1mg(准确至0.1mg)维生素C，用流动相溶解，移入50mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀，得内标物溶液，备用；精确称量250.3mg(准确至0。1mg)L-苯甘氨醇标准品，用流动相溶解，移入50mL容量瓶中定容至刻度，摇匀，得标准储备液，备用；精密称取合成L-苯甘氨醇样品(准确至0。1mg)，置于10mL容量瓶中，分别加入1mL内标物，用流动相定容至刻度，摇匀，备用。

配制的标准溶液，在选定的实验条件下，分别进样5μL，测得内标物及样品峰面积(平行测定5次)。

2。2线性关系
分别精密量取0.5，1，2，4，8mL标准储备液于10mL容量瓶中，各加入1mL内标物，定容配制系列标准溶液，备用。

3外标法
3.1标准溶液的配制
先用流动相配制1.000g/L的L-苯甘氨醇标准溶液，精密吸取1，2，4，6，8，10mL于10mL容量瓶中，然后用流动相稀释至刻度，得系列标准溶液，摇匀，备用。
3.2样品溶液配制
分别称取4份合成的L-苯甘氨醇4.0mg左右，用流动相配成10mL溶液，分别取20μL进样分析。

配制的标准溶液，在选定的实验条件下，分别取20μL(定量管)进样分析。