2-羟基-6-萘甲酸及其杂质含量的液相色谱测定
1、仪器与试剂
岛津LC-20AB HPLC仪，SPD-M20A PDA检测器，岛津LCsolution Ver1.X工作站，PHSJ-4A型酸度计 。
2-羟基-6-萘甲酸、2-羟基-3-萘甲酸、2-萘磺酸、1,4-萘二甲酸、2-羟基-6-萘甲酸甲酯，均为标准品，质量分数为99.5%；氢氧化钠、甲醇，分析纯；乙腈、四氢呋喃，色谱纯。实验所用水为试验室二级用水（0.45μm滤膜抽滤）。
2、标准曲线的绘制
配置质量浓度分别为4000mg/L的2-羟基-6-萘甲酸、0.8mg/L的2-萘磺酸、20mg/L的1,4-萘二甲酸、40mg/L的2-羟基-6-萘甲酸甲酯、20mg/L的2-羟基-3-萘甲酸标准液，然后分别稀释成不同的质量浓度，通过手动进样，色谱工作站计算标准曲线。
3、试样处理
称取试样约0.4克（精确到0.1mg）到100mL容量瓶中，用甲醇完全溶解后定容。
4、色谱条件
色谱柱为Aksail ODS 250mm×4.6mm×5μm；流动相：有机相为甲醇和乙腈以体积比4：1混合，水相为0.02mol/L KH2PO4/ H3PO4PH3.9的缓冲溶液，采用梯度洗脱。体积流量1.0mL/min，检测波长220nm，柱温40℃，进样量4.0μL。
5、测定
在以上操作条件下，采用外标法进行色谱分析，分析结果由岛津液相色谱工作站进行自动处理。
6、总结
以甲醇为溶剂，用ODS C18柱分离，以甲醇-乙腈（体积比4：1）和0.02mol/L的KH2PO4 （PH=3.9）为流动相进行梯度洗脱，能使被测的5个组分（2-羟基-6-萘甲酸、2-羟基-3-萘甲酸、2-萘磺酸、1，4-萘二甲酸、2-羟基-6-萘甲酸甲酯）完全分离，RSD分别为0.0004%、0.14%、0.23%、0.08%、0.11%，加标回收率为86.70%~100.5%，定量限、线性关系、精密度和加标回收率均能满足定量分析要求。