甘草酸的测定---高效液相色谱法
仪器设备:
1 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按甘草酸计算应不低于2000。
1.3 紫外吸收检测器
2色谱条件
2.1流动相:甲醇+0.2mol/l醋酸铵溶液+冰醋酸=67+33+1
2.2检测波长:250nm
2.3柱温:室温
试样制备: 1.称取供试品
精密量取本品细粉约0.25g,为供试品。
2.对照品溶液的制备
精密称取甘草酸单铵盐对照品10mg,置50ml量瓶中,加流动相45ml,超声处理使溶解,取出,放冷,加流动相稀释至刻度,摇匀,制成每1ml含甘草酸单铵盐对照品0.2mg,折合甘草酸为0.1959mg的溶液。
3.供试品溶液的制备
供试品,置50ml量瓶中,加流动相45ml,超声处理(功率200w,频率50khz)30分钟,取出,放冷,加流动相稀释至刻度,摇匀,滤过。精密量取续滤液10ml,置25ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
应用范围
本方法采用高效液相色谱法测定甘草浸膏中甘草酸的含量。
本方法适用于中成药甘草浸膏。
方法原理
本品经超声处理后,摇匀,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长250nm处检测甘草酸的吸收值,计算出其含量。
试剂
1.甲醇
2.0.2mol/l醋酸铵溶液
3. 冰醋酸
试样制备
1.称取供试品
精密量取本品细粉约0.25g,为供试品。
2.对照品溶液的制备
精密称取甘草酸单铵盐对照品10mg,置50ml量瓶中,加流动相45ml,超声处理使溶解,取出,放冷,加流动相稀释至刻度,摇匀,制成每1ml含甘草酸单铵盐对照品0.2mg,折合甘草酸为0.1959mg的溶液。
3.供试品溶液的制备
供试品,置50ml量瓶中,加流动相45ml,超声处理(功率200w,频率50khz)30分钟,取出,放冷,加流动相稀释至刻度,摇匀,滤过。精密量取续滤液10ml,置25ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
操作步骤
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ml,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长250nm处测定甘草酸(c42h62o16)的峰面积,计算出其含量。