方法一、以鹅去氧胆酸为原料3α,7α-二乙酰胆酸甲酯的制备取无水甲醇36ml，通入1g干燥氯化氢气体，加胆酸12g，搅拌，加热回流20-30min，室温放置数小时后析出晶体，冷冻，过滤，用乙醚洗涤，干燥，得胆酸甲酯。取胆酸甲酯2g，加苯9.6ml，加吡啶2.4ml，加乙酐2.4ml，振摇10-15min，室温放置20h，将反应液倒入100ml水中，除去苯层，反复用蒸馏水洗涤，回收溶剂，固体残渣用石油醚洗涤1次，用甲醇-水溶液重结晶，得3α，7α-二乙酰胆酸甲酯。

胆酸→胆酸甲酯→3α，7α-二乙酰胆酸甲酯鹅去氧胆酸的制备取二乙酰胆酸甲酯1.5g，加乙酸24ml，加铬酸钾溶液(取铬酸钾0.76g溶于1.8ml水中)，加热至40℃，反应8h，加水120ml，振摇片刻，放置12h，过滤，用蒸馏水洗至中性，干燥，得3α，7α-二乙酰氧基-12-酮基胆烷酸甲酯，简称12-酮。取12-酮15g，加二乙二醇醚150ml，加80%水合肼溶液15ml，加氢氧化钾15g，加热至30℃回流15h，升温至195-200℃，回流2.5h，升温至217℃反应片刻，冷却至190℃，加水合肼溶液0.7ml，在3h内由215℃升温至220℃，冷却，加蒸馏水600ml，加10%硫酸调pH3，析出结晶，过滤，水洗至中性，加乙酸乙酯，弃去水层，有机层用水洗1-2次，减压蒸馏，得白色3α，7α-二羟基胆烷酸，即鹅去氧胆酸。

3α，7α-二乙酰胆酸甲酯→3α，7α-二乙酰氧基-12-酮基胆烷酸甲酯→3α，7α-二羟基胆烷酸（鹅去氧胆酸）熊去氧胆酸精品的制备取鹅去氧胆酸2g，加100ml乙酸，加乙酸钾20g，振摇溶解，加铬酸钾1.5g(溶于10ml水中)，室温放置过夜，加水200ml，析出结晶，过滤，水洗，干燥，得3α-羟基-7-酮基胆烷酸。

取3α-羟基-7-酮基胆烷酸4g，加正丁醇100ml，加热至约115℃，分次加入金属钠8g，逐渐有白色浆状物析出，继续反应30min，加水120ml，搅拌升温溶解透明，减压蒸去有机层，残渣加水500ml，溶解，过滤，滤液加10%硫酸调pH3，有白色絮状物沉淀，过滤，水洗至中性，干燥，加乙酸乙酯洗涤，稀乙醇结晶，得3α，7β-二羟基胆烷酸，即熊去氧胆酸精品。鹅去氧胆酸[铬酸钾]→3α-羟基-7-酮基胆酸[金属钠，115℃]→3α,7β-二羟基胆烷酸（熊去氧胆酸）

方法二、以猪胆盐或猪胆汁为原料利用薄层层析法从猪胆盐或猪胆汁中，分离出熊去氧胆酸。猪胆盐中含有游离型和结合型的UDCA，其含量约30%；猪胆汁中含有结合型UDCA，含量约0.6%。