食品中“乙氧基喹啉”HPLC的测定方法
本法适用于辣椒粉,火锅香辛料等乙氧基喹啉地测定。
1. 试剂
标准溶液:准确称取乙氧基喹啉10.0mg,溶于乙腈后,定容至100.0ml,该标准溶液lml含乙氧基喹啉100p.g。乙酸铵溶液:把0.77g乙酸铵溶解于1000ml水中。乙腈:高香液相色谱纯。HPLC流动相:乙腈与乙酸铵溶液按7+3混合。
2. 仪器和器具
高效液相色谱仪:荧光检测器。HPLC用色谱柱:全多孔性硅胶健合十八烷基固定相填充于不锈钢柱管中(4.6mmid×150 250ram)
3. 试验溶液的制备
称取试样20g于带塞离心管中,加10ml已烷充分振摇混合后进行离心,分取已烷层。残渣每次再用10ml已烷提取二次,合并的已烷层放人分液漏斗中,加4.8mol/L NaOH溶液2ml使呈现碱性,迅速的用10ml已烷提取二次,合并已烷层,加5ml乙腈35~C以下减压浓缩至2-3ml,用流动相定容10.0m1.并用0.45um滤膜过滤,作为试验溶液。高效液相色谱分离条件:
柱ODS(4.6-6.0mmid×150 250mm)
流动相乙腈.乙酸铵溶液(7+3)
流速:1.0-1.2ml/min
柱温室温
检测:波长激光波长360nm 荧光波长440nm
定性:分别取标准溶液和试验溶液10,ul注入高效液相色谱仪进行分离,比较色谱图中保留时间进行定性。
定量:与定性分离条件相同,测量峰高和峰面积,于预先绘制的标准曲线求出乙氧基喹啉的含量。
绘制标准曲线 吸取标准溶液0.0 ml。2.0 m1.4.0 ml,6.0 ml,8.0 ml和10.0 ml与试样溶液分离条件相同进行HPLC分离,获得峰高或峰面积绘制标准曲线。调味料中乙氧基喹啉检测限为0.1mg/kg。
在辣椒粉中添加5mg/~和lOOmg/kg的回收率分别为87 92%和94 98%。
HPLC分离条件:
柱YMC AQ-303 S-5 120A ODS(4.6mmid×2$0mm)
流动相 乙腈.乙酸铵溶液(7:3)
流速1.2ml/min
柱温室温
检测器波长选择激光波长360nm
荧光波长440nm