O-甲基异脲的合成有以下两种方法。
(1)硫酸二甲酯法
(2)氰胺法

工业上一般采用硫酸二甲酯法。在500L反应釜中投入250kg硫酸二甲酯，搅拌加热到80℃，然后分批、少量地加入120kg尿素，反应放热，小心控制加料速度，使反应温度不超过100℃，加完后在90℃保持1h，冷却到50～60℃，出料，得到约370kg无色黏稠状液体，即O-甲基异脲的硫酸氢盐。