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香兰素报告

规格:99%
包装:25kg/桶
最小购量:1包
CAS:121-33-5
分子式: C8H8O3
分子量:152.15

食用香料——香兰素的抗氧化活性研究

  摘要:对食用香料香兰素的抗氧化活性进行了研究。分别采用甲基紫光度法、TBA显色法、SDS—PAGE检测法评价了香兰素的抗氧化效果。结果表明,香兰紊对蛋白质氧化降解具有明显的保护作用,对脂质过氧化有较好的抑制作用,具有良好的清除HO·自由基的能力,其抗氧化活性远远强于Vc。

  关键词:香兰素;vc;抗氧化活性

  香兰素(vaniUin)又名香草醛,为天然植物香料,主要存在于香子兰科植物果实中,在轻工业、化学工业、农业生产上都有广泛的应用,是医药化工中重要的原料或中间体,是用来制造治疗高血压、心脏病、皮肤病的常用药物。香料在食品上的应用,主要是改善食品风味,增添食物色泽。另外,有防止食品变质的抗氧化及抗菌作用,研究发现,许多香料如:迷迭香、姜黄、丁香、百里香等都具有较强的抗氧化活性。

  活性氧(ROS)是人体组织中许多生化反应的中问代谢产物,身体在代谢过程中所产生的ROS必须与组织细胞中的抗氧化系统达成平衡,一旦身体的抗氧化系统失去平衡,细胞中的氧化损害累积到相当程度,就会导致细胞结构和功能破坏、机体组织损伤。因此,ROS是包括肿瘤、心脑血管疾病、帕金森疾病、老年痴呆病和慢性肺炎等在内的多种疾病的重要诱因网。寻找能够有效清除自由基而无毒副作用的抗氧化剂,预防和减轻上述疾病的发生和发展,一直是人类研究的重要课题之一。本文用甲基紫光度法、TBA显色法、蛋白质凝胶电泳法测定了香兰索的体外抗氧化活性,并比较、分析了香兰素与已知抗氧化剂Vc的抗氧化能力。

  1材料与方法

  1.1材料

  香兰素:bob手办官网安卓版 化工有限公司;Vc、AAPH(2,2~偶氮二(2一脒基丙烷)二盐酸盐)、BHT(2,6一二叔丁基对甲基苯酚):Sigma公司;牛血清白蛋白(BSA);华美生物工程公司;十二烷基磺酸钠(SDS):Serva;实验用鼠由甘肃省肿瘤医院动物房提供,其余试剂均为国产分析纯。

  1.2仪器

  LSHZ一300冷冻水浴恒温振荡器:江苏太仓市实验仪器厂;DYY一6B型稳压稳流电泳仪:北京六一仪器厂;L8—60M型超高速离心机:Beckman;721分光光度计:上海第三分析仪器厂。

1.3方法

  1.3.1清除HO·自由基的测定

  取两份2.06mmol/L甲基紫溶液,调pH为3.5后,向其中一份加入0.2mmol/LFeSO4,以0.6%H2O2启动反应,一段时问后,以水为参比,于582nm处测吸光度值,记为A1。另一份不加Fenton试剂,测吸光度值,记为A。。则ΔA=A1一A。。测定清除率时,加入待测试剂,测吸光度值,记为A2。HO·的清除率=(A2一A1)/(A1一A0)×100%。

  1.3.2脂质过氧化的测定

  微粒体的制备参照Zhou等闻的方法。Lowry法测定蛋白质浓度。

  脂质过氧化的测定参照Cai等嘲。1mL反应体系中含有0.2mol/LPBS,240μg-400μg的微粒体蛋白,加入0.1mmol/L抗坏血酸及10μgmol/LFeSO4启动反应。在体系中加入0.1mL不同浓度待测物,于37℃振荡孵育1h后,1.0mL20%三氯醋酸终止反应,加入1.5mL0.67%硫代巴比妥酸,于沸水浴显色30min,冷却后离心,上清液于532nm比色,其半抑制浓度IC50。

  1.3.3蛋白质氧化降解的测定

  蛋白质氧化测定依H.Y.Kwon等[61的方法稍加改进。10μg牛血清白蛋白(BSA)的氧化在0.2mol/LPBS中由水溶性偶氮引发剂2Ommol/LAAPH启动,加入不同浓度的待测物,37℃水浴孵育24h后,加入0.02%BHT以防止氧自由基的进一步形成。样品按常规SDS—PAGE电泳,0.05%考马斯亮蓝R一250染色。

  2结果

  2.1对HO·自由基的清除作用

  香兰素对HO-自由基的清除率呈现一定的量效关系(见图1A),随香兰素浓度的增加,对HO-的清除效果明显增强,在浓度为180μmol/L清除率达到5O%,Vc在1000μmol/L时的清除率仅为41%(图1B),对HO-的清除作用不及香兰素。


  2.2对脂质过氧化的抑制作用

  香兰素对脂质过氧化的抑制率也呈现一定的量效关系,随香兰素浓度的增加,对脂质过氧化的抑制效果明显增强,在浓度为76μmol/L抑制率达到50%,与此相比,vc对脂质过氧化的抑制作用要远远低于香兰素,Vc在5000μmol/L时抑制率达到51%。

  2.3对蛋白质氧化的保护作用

  在10mmo]/LAAPH引发的氧化体系中,香兰素(V)对BSA的氧化降解有很强的保护作用,当浓度为12.5μmol/L时,即有微弱的保护作用。当浓度为100μmol/L时,已完全保护了蛋白质的氧化降解。Vc对AAPH引发的蛋白质氧化降解的作用则较差,在2000μmo/L时,才出现微弱的保护作用。

  3讨论

  近年来,国内外对香兰素已有很多研究,主要为香兰素合成方法的研究,有关香兰索抗氧化性的报道极少,香兰素在国内除直接用于制作食品外,主要用于调制食用香精,香兰素对含油食品具有明显的抗氧化作用,可显著延长含油食品的保质期,对细菌及真菌的生长有明显的抑制作用,另外,香兰素对癫痫也有一定的治疗效果啕。Vc是已知的HO-清除剂,对自由基具有很强的清除能力,是一种较早应用于食品、医药和临床的抗氧化剂。在鉴定、比较各种药物对自由基的清除能力时经常以它作为参照物。不同浓度Vc对Fenton反应所产生的羟基自由基进行清除时,其浓度与清除率之间存在明显的量效关系嘲。但从本实验结果来看,Vc抗脂质过氧化的作用较弱,表明Vc在此过氧化系统中的抗氧化作用是十分有限的。

  在本实验体系中,低浓度的香兰素对脂质过氧化和蛋白质的氧化降解,表现出很强的保护作用。其清除HO·自由基、抑制脂质过氧化和对蛋白质的氧化降解的保护作用明显优于Vc。实验证明,香兰素是一种很好的抗氧化剂,具有良好的抗氧化活性。我国具有丰富的香兰素资源,很大一部分以化工生产的中间体出口到国外,国内对香兰素的应用也仅限于食品、纺织和合成化工等行业,通过对香兰素抗氧化活性的研究,香兰素在食品和医药行业将具有更加广泛的开发前景。

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